黄曲霉素m1的检测方法是什么?高效液相色谱法的原理是什么?

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日期:2023-04-18 08:53:54    来源:汪清新闻网    

黄曲霉毒素M1(AFM1),是一种有机化合物,化学式为C17H12O7,主要用于新陈代谢和致癌的研究。2017年10月27日,世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考,黄曲霉毒素M1在2B类致癌物清单中。

黄曲霉素m1的检测方法是什么?

(1)AFM1标准溶液的配制

用三氯甲烷配制10μg/mL的AFM1标准溶液,用紫外分光光度计在357nm波长AFM1标准溶液的准确浓度(AFM1的摩尔消光系数为19950),避光4℃保存备用。

(2)样品提取

液体样品直接加入甲醇振荡过滤得提取液,固体样品粉碎过筛或研磨混匀后,用一定比例的甲醇水溶液振荡过滤得提取液。提取液可以先用石油醚和氯化钠溶液分配净化,再用三氯甲烷转相提取,氯化钠溶液水洗 ,无水硫酸钠脱水后,收集三氯甲烷层于65℃水浴通风挥干,最后用三氯甲烷将蒸发皿中残留物转移至浓缩管中,减压吹气法将此液浓缩至一定体积后备用。

(3)点样层析、展开、测定

各取10μL样品用浓缩液和标准液分别点于己在105℃活化2h的硅胶G薄层板上,置于加入一定量的展开剂的展析缸中展开,横展和纵展相结合,挥干后在紫外灯下观察并测量Rf值(一般AFM1的Rf值为0.34),并与标准溶液的最低检出量(0.0004μg)的荧光强度相比较,同时用硫酸溶液(1:3)显色剂喷荧光点,进行确证试验,最后按样品称 量值、浓缩体积、总稀释倍数、标准溶液最低检出量进行计算。

高效液相色谱法的原理是什么?

用C18柱抽提纯化样品中的AFM1,乙醚对C18柱洗涤,再用CH2Cl2-乙醇洗脱AFM1,然后加入三氟乙酸(TFA)对AFM1进行衍生化处理,利用液相色谱荧光检测器检测,并与标准AFM1-TFA的衍生物比较,进行定、定量分析。

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